Spetsiifilised sammud klorofülli ekstraheerimiseks rakkude fragmenteerimise teel ultraheli rakupurusti abil

Ultraheli rakupurusti kasutab ultraheli hajutamise efekti vedelikus, et tekitada kavitatsiooni, purustades seeläbi vedelikus olevad tahked osakesed või rakukuded.
Bioloogiatööstuse areng on tõstnud nõudeid ultraheli rakupulberitega tehtud katsetele, nagu proovi temperatuuri mõõtmine ja reguleerimine, madala temperatuuriga jahutusproovide ja kogu masina intelligentsuse taseme parandamine jne.
Spetsiifilised etapid klorofülli ekstraheerimiseks ultrahelirakkude purustamise teel, kasutades ultrahelirakkude purustajat:
1. Tsentrifuugige või filtreerige veeproov ja paigaldage imifiltrile atsetaatkiudfiltri membraan. Valage filtreerimiseks kvantitatiivne kogus vett ja alarõhk ei tohiks filtreerimise ajal olla liiga kõrge (umbes 50 kPa). Pärast veeproovi võtmist jätkake tõmbamist 1-2 minutit, et vähendada niiskust filtri membraanil. Kui vajate lühiajalist säilitamist 1-2 päeva, võib seda külmutada tavalises külmikus. Kui on vaja pikaajalist säilitamist (30 päeva), tuleb seda hoida madala temperatuuriga külmkapis (-20 kraadi).
2. Võtke välja fütoplanktonit sisaldav filtermembraan ja kuivatage seda madalal temperatuuril külmkapis 6-8 tundi. Lõika see kääridega väikesteks tükkideks ja aseta 5 ml või 10 ml tsentrifuugi katsutisse. Lisage 3-4 ml 90% atsetooni, et killud vedeliku tasemest allapoole sukelduda. Asetage killud ultrahelianumasse ja kasutage proovi rakkude purustamiseks ultrahelilaineid. (Erinevatel aegadel ja sagedustel tehtud katsete võrdlemine, et hõlbustada * killustumise aja ja sageduse tuvastamist ühtsete meetodite puhul).
3. Tsentrifuugige proovi, mille rakud killustati ultraheliga, kasutades tsentrifuugi (3000-4000r/min) 10 minutit. Valage supernatant 5 ml või 10 ml mõõtekolbi. Lahjendage 90% atsetooniga 5 ml või 10 ml-ni ja loksutage korralikult.
4. Asetage supernatant spektrofotomeetrile ja kasutage 1 cm optilise tee kolorimeetrilist tassi, et lugeda neeldumisväärtusi vastavalt lainepikkustel 750 nm, 663 nm, 645 nm ja 630 nm. Proovi neeldumise korrigeerimiseks kasutage pimekatse neeldumise mõõtmiseks 90% atsetooni.